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·前言 以外泌体为代表的细胞外囊泡是各个细胞释放出的膜囊泡,它作为细胞间信息传递的使者和疾病生物标志物,近年来受到了极高的关注*1)。虽然几年有关外泌体的研究在各领域中不断增长,但实验技术尚在发展阶段,还存在很多需要改善的问题。FUJIFILM Wako开发了一种新的亲和分离法——“PS亲和法”,与传统方法相比,能从各种样品中提取出完整且高纯度的外泌体,而且,该技术还成功开发出用于外泌体检测的...
近来关于细胞外RNA(exRNA)和细胞外泌体(EV)报道的涌现,凸显了外泌体及其内含物作为疾病和治疗靶标的生物标志物的潜力,其中最突出应用集中在在肿瘤学领域。目前越来越多的科研经费注入到EV的研究中来。 长久以来,虽然已有一些研究标明目前不同储存条件对外泌体存在影响,但外泌体保存条件的标准仍未定义有统一定论。上海交通大学研究了不同pH、温度和冻融次数等储存条件对外泌体的数量变化和细胞摄...
莫能菌素钠(Monein.sodium salt)是一种抗生素,行驶Na+离子载体的功能。莫能菌素钠的功能包括能阻止糖蛋白的分泌,通过细胞周期停滞和凋亡抑制几种淋巴瘤细胞系的增殖,以及阻止神经酰胺通过高尔基体转运等。图1莫能菌素钠结构式 细胞内的多泡体(MVBs)是一种由细胞内吞形成的结构,其中包含着许多通过将内体膜发芽到隔室腔中而形成的小囊泡。MVBs与质膜的融合后向细胞外分泌外泌体...
·试剂盒规格、功能Q1-1:本试剂盒中含有外泌体检测用的抗体吗?A1-1:本试剂盒中不含外泌体检测用的荧光标记抗体。荧光素结合抗CD63抗体(产品编号:018-27641)和红色荧光色素结合抗CD63抗体(产品编号:011-27751),或者其他合适的荧光标记抗体需另行购买。Q1-2:可以使用荧光标记二抗进行检测吗?A1-2:可以,分离外泌体后,按照以下操作进行一抗反应、二抗反应和游离细胞计数法分...
·试剂盒规格、功能Q1-1:一定要制备标准品吗?制备标准品时,是否必须使用MagCapture™外泌体提取试剂盒PS?A1-1:定量检测时,需要制备作为标准品的细胞外泌体。超速离心法和聚合物沉淀法等提取的细胞外泌体也可作为标准品,但还是推荐使用与检测原理相同的PS亲和法提取的细胞外泡作为标准品。(详细制备方法请参考MagCapture™外泌体提取试剂盒PS的使用说明书)。Q1-2:为什么没有配套的...
Anti Asialo GM1的抗血清可以与NK细胞(自然杀伤细胞)结合,抑制NK细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞,同种异体移植的器官、组织等。可用于药物筛选、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK细胞属于天然免疫细胞,具有免疫监视功能。 特异性:小鼠、大鼠的NK细胞,小鼠单核细胞(不含有NK细胞的肝脏细胞,骨髓,胎儿肝脏细胞,裸鼠巨噬细胞的脾细胞),胎儿T淋巴细胞(12天)...
Phos-tag™ SDS-PAGE是使用了Phos-tag™ Acrylamide或SuperSep的SDS-PAGE。可通过条带的迁移率差异,指示磷酸化蛋白的磷酸化水平。·特点·SDS-PAGE的条带根据蛋白的磷酸化水平变化·Phos-tag™的支持文献众多·Phos-tag™ SDS-PAGE的原理1.SDS-PAGE胶中的Phos-tag™ 捕获磷酸化蛋白。2.电泳中的磷酸化蛋白的...
·评价ULTRARIPA Kit B buffer单独提取脂篱蛋白的能力(数据提供:东京大学大学院药学系研究科卫生化学教室) 用PBS清洗COS-1细胞后,用SDS buffer、1%Triton X-100 buffer,ULTRARIPA Kit A buffer以及ULTRARIPA Kit B buffer溶解,离心(14,000rpm,5min,4°C)。分离可溶性组分和不溶性组分...
·实验材料及方法材料的获取:1年龄小鼠的上、下肢骨以及脊椎骨(切除软组织)一次固定:4%多聚甲醛溶液·10%福尔马林溶液二次固定:纯乙醇部分脊椎骨的非脱钙GMA树脂包埋处理,其他部分做脱钙处理。↓脱脂、脱钙:脱钙液是ZnSO4加EDTA溶液。(与其它方法相比)脱钙装置Histra-DC(普通光)8~16℃连续操作。↓脱水、包埋:ETP(Sakura产品)处理16小时,使用点为58-60℃嵌入式硬石...
“在细胞培养的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的瓶皿之中,细胞点点,引无数英雄竞挂东南枝。正所谓“万事开头难”,即便是细胞复苏与保存这两件看似简单的事情,也能造成实验汪内心无比巨大的阴影面积。”在2016年10月一篇名为:实验新人必读:细胞培养那些事儿。详细阐述了细胞冻存相关问题。引起了细胞生物学的重视。 在细胞冻存中存在三大问题。一、冻存液的配方...