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上海宇劲生物孙经理 
“在细胞培养的路上，有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的瓶皿之中，细胞点点，引无数英雄竞挂东南枝。正所谓“万事开头难”，即便是细胞复苏与保存这两件看似简单的事情，也能造成实验汪内心无比巨大的阴影面积。”在2016年10月一篇名为：实验新人必读：细胞培养那些事儿。详细阐述了细胞冻存相关问题。引起了细胞生物学的重视。
在细胞冻存中存在三大问题。一、冻存液的配方；二、冻存的分步降温；三、冻存液稳定性。
一般的冻存液配方基本具有三要素：培养基、血清、DMSO。培养基的选择要根据细胞种类。血清大多采用动物源血清，但血清中未知成分和感染物质会给冻存带来影响与风险。DMSO在细胞冻存中要保持在5%~15%范围内，过少会影响复苏，过多对细胞有毒性。综上所述，这么多因素制约着细胞冻存，稍不注意让您的细胞研究就会变得很“虐心”。
细胞冻存时要严格进行梯度降温（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡，谨记：缓降温！但如果真心赶时间时，可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存，而后尽快将其转入液氮中。
冻存液稳定性，无血清的稳定性比含血清稳定性高。与含血清类型相比，批次间的成分组成差异小，可保持稳定的品质。不含血清，因此没有因动物源的未知成分和感染物质所产生的影响与风险。可对无血清化细胞进行冷冻，节省再驯化步骤。
日本Wako推出一款无血清细胞冻存液——BAMBANKER产品，这款产品是细胞冻存研究的革新，那么它“新”在哪里呢？具有几大特点，无血清、无需分步降温，直接使用、无需程应降温盒，即用型细胞冻存液。完全解决了上述所有的不良因素。
那么有些读者要问了，这么优质的冻存液真正在应用方面怎么样呢？下面一张图片可以直观地看到其冻存液的“多样性"。
【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】
| 3T3‐L1（小鼠前脂肪细胞系） | A431（人扁平上皮癌细胞系） | BAEC（牛主动脉血管内皮细胞系） |
| Balb/3T3（小鼠成纤维细胞系） | C2C12（小鼠骨骼肌细胞系） | Daudi（人 B细胞系） |
| ECV304（人脐静脉内皮细胞系） | H295R（肾上腺皮质细胞） | HEK293（人胎儿肾细胞系） |
| HEK293T（人胎儿肾细胞系） | HeLa（人子宫颈癌细胞系） | HeLa S3（人子宫颈癌细胞系） |
| HepG2（人肝癌细胞系） | HFF（人正常成纤维细胞系） | Huh7（人肝癌细胞系） |
| Jurkat（人白血病T细胞系） | K562（人慢性骨髓性白血病细胞系） | KATOIII （人胃癌上皮细胞系） |
| KLM‐1（人胰腺癌细胞系） | 犬肾小管上皮细胞系 | MEF（小鼠胚胎成纤维细胞） |
| NIH3T3（小鼠胎儿皮肤细胞） | OKT4（小鼠杂交瘤细胞） | OP9（小鼠骨髓基质细胞） |
| P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系） | PANC‐1（人胰腺癌细胞系） | PC12（大鼠源肾上腺嗜铬细胞瘤） |
| RPE（人细膜上皮细胞系） | SNL（小鼠胚胎成纤维细胞） | TSU‐Pr1（人前列腺癌细胞系） |
| Vero（非洲绿猴肾细胞系） | human γδT cells （人γδT细胞） | human B cell line （人B细胞系） |
| 猴B细胞系 | 人外周血活化淋巴细胞 | 永生化人肌肉细胞 |
| 小鼠脾脏活化淋巴细胞 | 小鼠ES细胞系 | 人胃上皮细胞 |
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