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上海宇劲生物孙经理 
货号：297-79201
本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析，以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的蛋白包被到板上，细胞外囊泡与其反应固定后，用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗，试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗，可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外，试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗，可检测出人CD63阳性外囊泡。
| 品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
| Wako | 297-79201 | PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD) PS Capture™外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD） | 96 tests |
说明书：
产品资料：
PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠lgGPOD）
培养物上清的外泌体定性·定量分析
·特点
采用PS结合分子Tim4包被板
·通过磷脂酰丝氨酸（PS）结合分子进行捕捉。*1
·可检测出0.1uL培养上清液细胞外囊泡。
·用纯化细胞外泡为标准品*2进行定量检测。
·可通过WB法*3进行50～1,000倍高灵敏度检测。
↓↓
培养上清的细胞外泡高灵度定性。定量检测
*1 比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外臻泡的定性定量分析。
*2 请使用MagCapture mM Exosome Isolation Kit PS获得外泡标准品。
*3 WB法：免疫印迹实验
最优化试剂盒
·最优化对照用一抗*4
·最优化检测用二抗*5
·采用显色法
↓↓
操作简便，实验重复性高
*4附加抗人CD63抗体。检则其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。
*5附加抗小lgG抗体-HRP标记。
·测定原理·产品概述
本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外泌体定性分析，以及细胞上清样品外泌体定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外泌体表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的蛋白包被到板上，细胞外泌体与其反应固定后，用任意外泌体表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗，试剂盒的HRP标记小鼠gG抗体为二抗，可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外泌体。另外，试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗，可检测出人CD63阳性外泌体。
通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS（Code No.：293-77601）提纯细胞培养上清和体液样品中的外泌体，通过本试剂盒对细胞外泌体的表面标记蛋白进行免疫印迹实验，可50~1，000倍高灵敏度且简便进行检测。另外，从细胞上清中利用MagCaptureM Exosome lsolation Kit PS获得外囊泡作为标准品，可对细胞上清外囊泡进行定量分析。
·试剂盒组成
| 试剂盒组成（96次） | 包装 |
| 捕获外泌体96孔板 | 1个（8 well×12 strips） |
| 反应/洗涤缓冲液（10×） | 50mL×2瓶 |
| 外泌体结合增强子（100×） | 10mL×1瓶 |
对照一抗Anti-CD63（100×） | 120uL×1瓶 |
| 二抗HRP缀合抗小鼠gG（100×） | 120uL×1瓶 |
| TMB溶液 | 12mL×1瓶 |
| 终止液 | 12mL×1瓶 |
| 封板膜 | 4个 |
| 说明书 | 1本 |
·案例
各种细胞培养上清纯化外泌体定性分析
将各种细胞获得的纯化外泌体1ng添加至板孔中，利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对表面标记量进行定性比较。
另外，作为比较参考数据，将各细胞纯化150ng外泌体进行电泳，利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。
ELISA系统和WB分析之间，已确认标记蛋白表达模式具有相关性！！
正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析
将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外泌体，通过BCA检测外泌体膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中，用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。
使用从体液样品纯化的细胞外泌体具有良好的线性！！
细胞培养上清纯化细胞外泌体的检测灵敏度参考数据
COLO201细胞培养上清纯化外泌体，比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。
免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较
（a），（b）使用各种抗CD63抗体（其他公司产品，Wako产品：Code No.012-27063）进行免疫印迹实验检测灵敏度数据
样品：COLO201细胞培养上清纯化外泌体（使用MagCapture™ Exosome lsolation Kit PS纯化）
*：各抗体免疫印迹实验的检测限。
（c）Exosome ELISA Kit检测限数据
用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外泌体（使用MagCapture™ Exosome lsolation Kit PS纯化）进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定，制作COLO201标曲线。利用此标曲线可算出COLO201源纯化样品的最低检测灵敏度。（测定各浓度点n=6，空白点n=12）
比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。
细胞培养上清样品的稀释线性（Linearity）参考数据
COLOC201细胞培养上清纯化外泌体为标准品制作标准曲线，以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品（1：100-1：1600）进行稀释线性进行评估。
| COLOC201细胞培养上清 | |||||
| CM量（uL） | 稀释 | 测定值（ng/mL） | 期望值（ng/mL） | 预期百分比 | |
| 比率 | 稀释因子（×） | ||||
| 0.0625 | 1：1600 | 0.000625 | 0.89 | 0.91 | 98.4 |
| 0.125 | 1：800 | 0.00125 | 1.82 | 1.72 | 105.6 |
| 0.25 | 1：400 | 0.0025 | 3.44 | 3.52 | 97.8 |
| 0.5 | 1：200 | 0.005 | 7.04 | 6.78 | 103.9 |
| 1 | 1：100 | 0.01 | 13.6 | — | — |
标准品：COLO201细胞源外泌体
（使用MagCapture™ Exosome lsolation Kit PS纯化）
测定样品：COLO201细胞培养上清
一抗：试剂盒附带抗CD63抗体
良好的稀释线性，已确认可检测0.1uL培养上清的细胞外泌体。
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