说明书：

295-71701MicroRNA提取试剂盒.pdf

血清·血浆（Serum·Plasma）microRNA提取试剂盒

microRNA Extractor（R）SP Kit

   本产品主要用于提取人（或者实验动物：小鼠等）血清、血浆中microRNA。不使用苯酚和氯仿等有害物质，蛋白酶和离液剂、离心柱组合使用可简便且高效率获得血清血浆中microRNA。适用于提取血液循环microRNA，各种疾病研究、检测活体转染实验中血液SiRNA残留量样本的制备。

·试剂盒组成（50次/试剂盒）

（1）Lysis Solution 19 mL×1 bottle

（2）Reducing Agent 50 uL×1vial

（3）Protease Solution 500uL×1 vial

（4）Enhancer 500uL×1 vial

（5）Wash Solution I 12mLx1 bottle

（6）Wash Solution II 21 mL×1 bottle

（7）Elution Solution 5mL×1 bottle

（8）Spin Column 50 columns

（9）Collection Tube 50 tubes

需要以下试剂

1-Butanol（Code No.022-16035）正丁醇

2-Propanol（Code No.168-21675）2-丙酮

Ethanol（Code No.054-07225）乙醇

<用前注意事项>

   血浆的抗疑剂请使用EDTA或者柠檬酸。如果使用肝素的话，会影响RNA提取后的PCR检测。

·实验流程

   详细实验流程请看相关瓷料的说明书

正常人血浆microRNA提取·定量结果

 内源性has-miR-16定量结果                         内源性has-miR-451定量结果

本产品比以往方法有更高的提取效率（试剂盒·试剂的比较对象）

A公司试剂盒：有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

B公司试剂盒：有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

C公司试剂：AGPC法产品。

正常人血浆·血清microRNA提取·定量结果

内源性has-miR-16定量结果

本产品的血浆、血清提取率比其他产品高

左图：正常人血浆（抗凝剂：EDTA）右图：正常人血清

定量检则：TaqMan@MicroRNA Assays（Life Technologies公司）

上图显示在血浆·血清提取效率方面，本试剂盒比A公司产品更高。另外，血浆比血清含有更多microRNA。

大鼠血浆·血清microRNA提取·定量结果

内源性rmo-miR-16提取·定量结果

·提取对象：实验动物亦可

·血浆的抗疑剂：EDTA。

·定量检则：TaqMan MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。

·已确认在实验动物（大鼠）的血浆以及血清的提取效率方面，使用本试剂盒比A公司试剂盒高。

回收效率的可重复性评估

正常人血浆滴加cel-miR-238定量回收结果

·确认可重复性高

·定量检则：TaqMan MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。

·左图是添加10⁴~10⁸拷贝数的cel-miR-238至正常人血浆（抗凝剂：柠檬酸钠）的回收率。

·添加10⁴考贝数/test的低浓度下能够稳定地回收microRNA，回收率在60%-80%。与基因组DNA和total RNA相比获取较园难的低分子RNA也具有高回收率。

·注意：将Protocol记录的洗脱液添加量从50 uL提升到100uL，回收率增加5~20%。

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