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荧光定量PCR技术服务

实时PCR（real-time PCR），属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。

名称：荧光定量PCR技术服务

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一、服务介绍
实时PCR（real-time PCR），属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。
二、实验原理
实时PCR的定量使用荧光色素，目前有二种方法。一种是在ds DNA中插入特异的荧光色素，例如SYBR Green荧光染料；另一种使用一种能与增幅DNA序列中特定寡核酸序列相结合的一种荧光探针（probe），如Taqman探针。两种方法原理不同。SYBR Green荧光染料游离时不发光，当反应体系中存在双链DNA时，SYBR Green与双链DNA结合，此时才发光。Taqman探针带有一个荧光基团和一个淬灭基团，荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭基团则在3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5′－3′外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，此时荧光基团发出的荧光信号可以被检测到。real time PCR 与 reverse transcription PCR 相结合，能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT-PCR的组合又被称之为“定量RT-PCR（quantitative RT-PCR）”。
三、实验流程
1.提取RNA；
2.DNAse I 消化样品RNA 中的DNA；
3.RNA琼脂糖凝胶电泳；
4.RNA反转录为cDNA；
5.cDNA与引物质量检测；
6.利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况；
7.定量 PCR检测；
8.分析扩增曲线和溶解曲线
四、服务说明
1.客户提供：模板RNA或相关材料等，试剂盒(可代购)。
2.公司提供：转录成功的DNA；电泳图。
3.实验周期： 3天到1周。
五、质量承诺
提供足量DNA，清晰的图片，及DNA的分析研究和检测鉴定报告。

实时PCR（real-time PCR），属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。

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