外泌体(Exosome)是直径约为30-150nm，密度在1.13-1.21g/m1的小囊泡。Exosome天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。

研究发现，Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA，并且exosome能够通过生物屏障，在细胞间传递功能性核酸分子，从而发挥各种生物学功能。

外泌体的形成以及分泌

大多数类型的细胞都可以分泌外泌体，同时外泌体也广泛存在于体液中，包括血液、眼泪、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究发现外泌体中富含核酸（microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA 等）、蛋白、胆固醇等。外泌体的表面 marker 主要有 CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27 等[2]（图 2）。因此，外泌体几乎可以与任何疾病相关联，成为疾病标志物、疾病机理、药物开发等研究的创新热点。

外泌体的来源和内含物

宇劲生物致力于为广大研究人员和企业提供高品质的外泌体研究解决方案。宇劲生物不仅代理日本Wako的外泌体提取试剂盒，还提供包括外泌体超速离心、外泌体NTA分析、外泌体透射电镜拍摄、外泌体标志物蛋白Western Blot鉴定、外泌体蛋白质谱分析、外泌体分泌蛋白筛选、外泌体microRNA筛选等一系列服务环节的“一站式”外泌体服务体系，将为广大用户提供外泌体研究多方位的便利与支持。

一、外泌体的分离

（一）试剂盒提取

Wako（日本和光）研发的PS亲和法，MagCapture Exosome Isolation Kit PS实现了简捷地纯化高纯度完整状态的外泌体。这是迄今为止取代黄金标准超速离心法的新型外泌体纯化法。

·特点

·可提取高纯度完整的外泌体

·可从血清、血浆、尿液等样品中提取外泌体

·重复性高，回收量稳定

·操作简单，可处理多个样品（无需超速离心）

超速离心是从生物体液或细胞上清分离外泌体的金标准方法。采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。目前在国内外的重要期刊如Cell、Nature、Science以及其众多子刊中，超速离心是普遍应用的经典技术手段。

  二、外泌体鉴定服务

对分离提取的外泌体进行鉴定的经典方案有：NTA分析（Nanoparticle Tracking Analysis）、电镜分析、蛋白标志物Western Blot鉴定等。华盈生物拥有完善的外泌体鉴定平台和技术体系，可提供全方位的外泌体鉴定服务。

（一）、NTA粒径分析

纳米颗粒跟踪分析技术软件（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA）单独跟踪视野中每一个颗粒的运动轨迹以得到每一个颗粒的粒径信息。

ZetaView ，由德国Particle Metrix公司推出，采用单一颗粒跟踪技术，结合经典微电泳技术和布朗运动，检测10nm–3000nm 范围内的颗粒，是新一代的纳米颗粒分析手段。ZetaView通过纳米颗粒zeta电位的跟踪与计算，分析待测粒子的粒径和数量，其优势为自动化程度高，数据重复性好。

（二）、外泌体电镜分析

双层囊膜结构（茶托状）是外泌体重要标志之一，但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm，可将被观察物体放大至数百万倍，是外泌体双层囊膜超微结构观测的经典方法。

宇劲生物有多种外泌体样品和上千张外泌体电镜图片的拍摄经验，在制样、拍摄、选片等方面具备丰富经验

实拍电镜结果展示

（三）、外泌体标志物鉴定

宇劲生物通过对经典文献中普遍采用的抗体进行验证和挑选，优选了多种外泌体标志物抗体，如CD9、CD63、CD81、TSG101、Alix等，针对不同来源的外泌体，我们还可协助用户对标志物进行合理选择，并可提供常见外泌体标志物的Western blot检测服务。